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抗人球蛋白交叉配血卡標準操作程序
來源:博迅生物    發布時間:2009年11月21日

一、準備工作

    (一)微柱凝膠試劑卡的準備:觀察外觀,如有干膠、雜質、氣泡不可使用,之后將卡放置室溫(1825℃)平衡,再用專用離心機離心5分鐘。

    (二)檢測標本的準備:

     1.紅細胞懸液的制備:將受血者與獻血者的紅細胞和血漿分離,各取其壓積紅細胞10ul,分別加入含1.01.2毫升紅細胞稀釋液的兩個試管中,外觀應為均勻淡紅色,無絮狀物和血塊。

     2.血清標本的制備:采集被檢對象靜脈血,放入含兔腦粉或其它促凝劑的試管中,10分鐘后離心,取上清

二、操作步驟

      1.將準備好的抗人球蛋白交叉配血卡做好標記。

      2.將獻血者紅細胞懸液1滴(或50μl)與受血者血清1滴(或50μl)先后加入主側管中。

      3.將受血者紅細胞懸液1滴(或50μl)與獻血者血清1滴(或50μl)先后加入次側管中。

      4.加樣后的試劑卡,置37℃孵育器中孵育15分鐘。

      5.使用專用離心機離心5分鐘(900rpm2分鐘,1500 rpm3分鐘),取出肉眼觀察結果。

三、結果判定

     1.陰性結果:紅細胞完全沉降于凝膠管底部,表明受血者與獻血者血型相合。

     2.陽性結果:紅細胞凝集塊位于凝膠表面或凝膠中,表明受血者與獻血者血型不相合。

四、注意事項

  1.應用直接抗人球蛋白微柱凝膠免疫試驗檢測病人紅細胞時,一定要用適量EDTA的試管采血液標本,該標

     本不能放入4℃-10℃冰箱保存,以避免紅細胞病人體外致敏所致假陽性反應。

  2.紅細胞標本一定不能被細菌污染,否則出現假陽性反應。盡可能應用當日采集的新鮮血做本試驗。如不

     得不用過夜血或陳舊血,則必須首先用該標本做陰性對照試驗,以確定該標本是否可以做本實驗。

  3.血清標本:血清標本必須充分去纖維蛋白,否則標本中纖維蛋白在微柱凝膠中析出,阻礙陰性紅細胞沉

     淀,呈假陽性反應。

  4.如在微柱凝膠管中出現溶血現象,強烈提示為紅細胞抗原抗體陽性反應,也不排除其他原因所致溶血,

     故對此標本一定認真分析,并向上級主管技術人員報告并討論其原因。

  5.每日試驗前,先取出微柱凝膠卡放置至室溫。

  6.試劑卡應放在18-25℃儲存,如若長期放在4℃冰箱,建議每1-2個月取出,用專用離心機離心一次,以防

     止干膠或產生氣泡。

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